HPLC純化檢測服務

高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。 高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統, 將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱, 在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。

高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:

①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。
②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。
③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
④高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,進樣量在μL數量級。
⑤應用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。
此外高效液相色譜還有色譜柱可反復使用、樣品不被破壞、易回收等優點,但也有缺點,與氣相色譜相比各有所長,相互補充。高效液相色譜的缺點是有“柱外效應”。在從進樣到檢測器之間,除了柱子以外的任何死空間(進樣器、柱接頭、連接管和檢測池等)中,如果流動相的流型有變化,被分離物質的任何擴散和滯留都會顯著地導致色譜峰的加寬,柱效率降低。高效液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。

強耀生物色譜特點

  • 高壓——壓力可達150~300 kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上。
  • 高速——流速為0.1~10.0 mL/min。
  • 高效——塔板數可達5000/米。在一根柱中同時分離成份可達100種。
  • 高靈敏度——紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。
  • HPLC與經典液相色譜相比有以下優點:
  • 速度快——通常分析一個樣品在15~30 min,有些樣品甚至在5 min內即可完成。
  • 分辨率高——可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果。
  • 靈敏度高——紫外檢測器可達0.01ng,熒光和電化學檢測器可達0.1pg。
  • 色譜柱可反復使用——用一根色譜柱可分離不同的化合物。
  • 樣品量少,容易回收——樣品經過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。

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